技術文章

Technical articles

當前位置:首頁技術文章多種真菌毒素專(zhuan) 用柱液質質法 一步通過法SPE柱淨化穀物類

多種真菌毒素專用柱液質質法 一步通過法SPE柱淨化穀物類

更新時間:2022-08-25點擊次數:2919

真菌毒素為(wei) 真菌增殖時產(chan) 生的次生有毒代謝產(chan) 物。

真菌的孢子能透過空氣、風力、水流和動物等方式來傳(chuan) 播。隻要有少量蛋白質、澱粉、脂質及水份,就是適合真菌生長的環境,因此穀物、果實類、玉米及花生都是真菌主要生長處。

 

黃曲毒素具有潛在性的肝毒害(hepatoxin)及致癌性,其性質穩定,因此真菌毒素易出現在食物鏈中;除了直接食用被真菌毒素汙染的食物,也可能透過飼料讓動物生病。

 

真菌毒素汙染食品和飼料對於(yu) 全球性作物及動物養(yang) 殖業(ye) 影響很大。

據估計每年約25%農(nong) 作物受到不同程度的真菌毒素汙染,以美國和加拿大而言,真菌毒素造成飼料業(ye) 和家畜業(ye) 每年損失約50億(yi) 美金(IFST, 2006)

 

本篇應用以FaTEx-gen快速淨化萃取淨化柱進行前處理,使用LC-MS/MS分析11種真菌毒素的含量, 包含黃曲毒素類、赭曲毒素A及鐮孢菌毒素類(伏馬毒素、脫氧雪腐鐮刀菌烯醇(嘔吐毒素)、玉米赤黴毒素等),建立一套快速準確的檢測方法,利於(yu) 維護飼料質量及相關(guan) 作物食品安全。

 

搭配ZORBAX Eclipse Plus C18色譜柱及Agilent 6470液相層析串聯式質譜儀(yi) ,檢測穀物、黃豆及花生等基質。

 

樣品製備流程如下:

 

樣品秤樣後加標靜置,加入12mL萃取溶液,高速震蕩機震蕩30分鍾,於(yu) 3500rpm離心5分鍾,得到上清液。

取一定量的上清液通過FaTEx-gen SPE柱淨化,氮吹回溶後上機到LC-MSMS分析。

 

分析結果如表三所示,回收率落在81.9~112.7%範圍內(nei) ,CV%皆小於(yu) 20,顯示此為(wei) 一快速、穩定之檢驗方法。

 

前處理步驟和儀(yi) 器分析條件,歡迎索取。

產(chan) 品信息:FaTEx-gen  真菌毒素專(zhuan) 用SPE柱       巨研科技     50/

 

2、黴菌毒素11項藥劑之添加濃度

分析物

中文名稱 

添加濃度(ng/g)

Aflatoxin B1

黃曲黴素 B1

2.5

Aflatoxin B2

黃曲黴素 B2

2.5

Aflatoxin G1

黃曲黴素 G1

2.5

Aflatoxin G2

黃曲黴素 G2

2.5

Ochratoxin A

赭曲黴毒素 A

2.5

T-2 toxin

T-2毒素

5

HT-2 toxin

HT-2毒素

5

Deoxynivalenol

嘔吐毒素

25

Zearalenone

玉米赤黴烯酮

25

Fumonisin B1

伏馬毒素 B1

100

Fumonisin B2

伏馬毒素 B2

100

 

3、穀類樣品中11項黴菌毒素之回收率和變異係數

中文名稱

英文名稱

黃豆

花生

CV%

R%

CV%

R%

黃曲黴素 B1

Aflatoxin B1

2.3

108.5

9.0

97.5

黃曲黴素 B2

Aflatoxin B2

3.7

105.0

2.4

98.2

黃曲黴素 G1

Aflatoxin G1

2.6

105.4

2.0

102.9

黃曲黴素 G2

Aflatoxin G2

3.4

107.4

4.0

103.0

赭曲黴毒素 A

Deoxynivalenol

4.8

100.3

1.6

103.9

T-2毒素

Fumonisin B1

8.1

90.3

6.1

89.0

HT-2毒素

Fumonisin B2

13.5

81.9

5.3

96.7

嘔吐毒素

HT-2 toxin

9.1

109.7

13.4

100.4

玉米赤黴烯酮

Ochratoxin A

2.8

101.9

3.8

106.0

伏馬毒素 B1

T-2 toxin

5.9

110.1

5.6

112.7

伏馬毒素 B2

Zearalenone

8.1

108.6

5.0

94.4

*重複性,n=3

 

結論:

1、本篇以FaTEx-gen萃取淨化套組搭配ZORBAX Eclipse Plus C18管柱於(yu) 液相串聯質譜之分析方法,檢測穀類樣品(黃豆及花生)之多重黴菌毒素(黃曲毒素類、赭曲毒素A及鐮孢菌毒素類)共11項,每次分析時間13分鍾,為(wei) 快速準確的檢驗方法。

2、 FaTEx-gen萃取淨化套組可針對複雜檢體(ti) 基質加強淨化,降低基質幹擾。

3、 FaTEx-gen套組檢測添加多重毒素標準品之穀類樣品(添加濃度:黃曲黴素B1 Aflatoxin B1,黃曲黴素B2  Aflatoxin B2,  黃曲黴素G1  Aflatoxin G1,  黃曲黴素G2 Aflatoxin G2,赭曲黴毒素 A  Ochratoxin A2.5 ng/gT-2 toxin, HT-2 toxin5 ng/g;嘔吐毒素Deoxynivalenol, 玉米赤黴烯酮 Zearalenone25 ng/g;伏馬毒素 B1  Fumonisin B1,伏馬毒素 B2  Fumonisin B2100 ng/g)回收率落在81.9~112.7%範圍內(nei) ,變異係數皆小於(yu) 20,為(wei) 穩定之檢驗方法。