技術文章
Technical articles真菌毒素為(wei) 真菌增殖時產(chan) 生的次生有毒代謝產(chan) 物。
真菌的孢子能透過空氣、風力、水流和動物等方式來傳(chuan) 播。隻要有少量蛋白質、澱粉、脂質及水份,就是適合真菌生長的環境,因此穀物、果實類、玉米及花生都是真菌主要生長處。
黃曲毒素具有潛在性的肝毒害(hepatoxin)及致癌性,其性質穩定,因此真菌毒素易出現在食物鏈中;除了直接食用被真菌毒素汙染的食物,也可能透過飼料讓動物生病。
真菌毒素汙染食品和飼料對於(yu) 全球性作物及動物養(yang) 殖業(ye) 影響很大。
據估計每年約25%農(nong) 作物受到不同程度的真菌毒素汙染,以美國和加拿大而言,真菌毒素造成飼料業(ye) 和家畜業(ye) 每年損失約50億(yi) 美金(IFST, 2006)。
本篇應用以FaTEx-gen快速淨化萃取淨化柱進行前處理,使用LC-MS/MS分析11種真菌毒素的含量, 包含黃曲毒素類、赭曲毒素A及鐮孢菌毒素類(伏馬毒素、脫氧雪腐鐮刀菌烯醇(嘔吐毒素)、玉米赤黴毒素等),建立一套快速準確的檢測方法,利於(yu) 維護飼料質量及相關(guan) 作物食品安全。
搭配ZORBAX Eclipse Plus C18色譜柱及Agilent 6470液相層析串聯式質譜儀(yi) ,檢測穀物、黃豆及花生等基質。
樣品製備流程如下:
樣品秤樣後加標靜置,加入12mL萃取溶液,高速震蕩機震蕩30分鍾,於(yu) 3500rpm離心5分鍾,得到上清液。
取一定量的上清液通過FaTEx-gen SPE柱淨化,氮吹回溶後上機到LC-MSMS分析。
分析結果如表三所示,回收率落在81.9~112.7%範圍內(nei) ,CV%皆小於(yu) 20,顯示此為(wei) 一快速、穩定之檢驗方法。
前處理步驟和儀(yi) 器分析條件,歡迎索取。
產(chan) 品信息:FaTEx-gen 真菌毒素專(zhuan) 用SPE柱 巨研科技 50隻/盒
表2、黴菌毒素11項藥劑之添加濃度
分析物 | 中文名稱 | 添加濃度(ng/g) |
Aflatoxin B1 | 黃曲黴素 B1 | 2.5 |
Aflatoxin B2 | 黃曲黴素 B2 | 2.5 |
Aflatoxin G1 | 黃曲黴素 G1 | 2.5 |
Aflatoxin G2 | 黃曲黴素 G2 | 2.5 |
Ochratoxin A | 赭曲黴毒素 A | 2.5 |
T-2 toxin | T-2毒素 | 5 |
HT-2 toxin | HT-2毒素 | 5 |
Deoxynivalenol | 嘔吐毒素 | 25 |
Zearalenone | 玉米赤黴烯酮 | 25 |
Fumonisin B1 | 伏馬毒素 B1 | 100 |
Fumonisin B2 | 伏馬毒素 B2 | 100 |
表3、穀類樣品中11項黴菌毒素之回收率和變異係數
中文名稱 | 英文名稱 | 黃豆 | 花生 | ||
CV% | R% | CV% | R% | ||
黃曲黴素 B1 | Aflatoxin B1 | 2.3 | 108.5 | 9.0 | 97.5 |
黃曲黴素 B2 | Aflatoxin B2 | 3.7 | 105.0 | 2.4 | 98.2 |
黃曲黴素 G1 | Aflatoxin G1 | 2.6 | 105.4 | 2.0 | 102.9 |
黃曲黴素 G2 | Aflatoxin G2 | 3.4 | 107.4 | 4.0 | 103.0 |
赭曲黴毒素 A | Deoxynivalenol | 4.8 | 100.3 | 1.6 | 103.9 |
T-2毒素 | Fumonisin B1 | 8.1 | 90.3 | 6.1 | 89.0 |
HT-2毒素 | Fumonisin B2 | 13.5 | 81.9 | 5.3 | 96.7 |
嘔吐毒素 | HT-2 toxin | 9.1 | 109.7 | 13.4 | 100.4 |
玉米赤黴烯酮 | Ochratoxin A | 2.8 | 101.9 | 3.8 | 106.0 |
伏馬毒素 B1 | T-2 toxin | 5.9 | 110.1 | 5.6 | 112.7 |
伏馬毒素 B2 | Zearalenone | 8.1 | 108.6 | 5.0 | 94.4 |
*重複性,n=3
結論:
1、本篇以FaTEx-gen萃取淨化套組搭配ZORBAX Eclipse Plus C18管柱於(yu) 液相串聯質譜之分析方法,檢測穀類樣品(黃豆及花生)之多重黴菌毒素(黃曲毒素類、赭曲毒素A及鐮孢菌毒素類)共11項,每次分析時間13分鍾,為(wei) 快速準確的檢驗方法。
2、 FaTEx-gen萃取淨化套組可針對複雜檢體(ti) 基質加強淨化,降低基質幹擾。
3、 以FaTEx-gen套組檢測添加多重毒素標準品之穀類樣品(添加濃度:黃曲黴素B1 Aflatoxin B1,黃曲黴素B2 Aflatoxin B2, 黃曲黴素G1 Aflatoxin G1, 黃曲黴素G2 Aflatoxin G2,赭曲黴毒素 A Ochratoxin A:2.5 ng/g,T-2 toxin, HT-2 toxin:5 ng/g;嘔吐毒素Deoxynivalenol, 玉米赤黴烯酮 Zearalenone:25 ng/g;伏馬毒素 B1 Fumonisin B1,伏馬毒素 B2 Fumonisin B2:100 ng/g)回收率落在81.9~112.7%範圍內(nei) ,變異係數皆小於(yu) 20,為(wei) 穩定之檢驗方法。